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民間怪醫易新亮_第6章 載體選擇(1)

靶點篩選工作告一段落後,團隊立即投入到載體構建的緊張工作中。這是將理論設想轉化為實際治療方案的關鍵一步,趙坤作為團隊中的分子生物學專家,肩負起了這個重任。

清晨的實驗室內,趙坤正在除錯基因合成儀。他面前擺放著厚厚一沓設計圖紙,上面密密麻麻標註著各種基因元件的連線方式。

“我們需要構建一個能夠同時表達兩個scFv片段的載體,”趙坤向團隊成員解釋,“一個靶向NY-ESO-1,另一個靶向病毒受體CAR。”

易新亮仔細檢視設計圖:“這兩個scFv片段如何協調工作?是同時表達還是交替表達?”

“我設計了串聯表達的方式,”趙坤指著圖紙上的結構,“兩個scFv透過柔性linker連線,形成雙特異性CAR。這樣每個CAR-T細胞都能同時識別兩個靶點。”

張悅提出了關鍵問題:“這種設計會不會影響scFv的空間構象?如果構象改變,可能會影響抗原識別的準確性。”

“這正是需要驗證的,”趙坤點頭,“我特意選擇了較長的GS linker,它具有良好的柔韌性,應該能保持scFv的正確構象。”

尹美秋從中醫角度提出了建議:“這就像配伍用藥,君臣佐使各司其職。兩個scFv也要主次分明,協同作戰。”

經過討論,團隊決定將NY-ESO-1的scFv作為主要靶向域,病毒受體CAR的scFv作為輔助靶向域。

基因合成工作開始了。趙坤首先合成NY-ESO-1的scFv序列。這是一個包含輕鏈和重鏈可變區的單鏈抗體片段,總長度約750bp。合成過程中,他特別注意保留關鍵的抗原結合位點。

“輕鏈的CDR3區有一個特殊的疏水核心結構,”趙坤在顯微鏡下觀察合成過程,“這個結構對NY-ESO-1的識別至關重要。”

與此同時,林小雨在準備質量控制所需的試劑。“每個合成階段都要進行測序驗證,”她認真記錄著操作規程,“確保序列完全正確。”

第一個scFv合成完成後,趙坤開始合成病毒受體CAR的scFv。這個序列相對複雜,因為病毒受體是一個多次跨膜蛋白,其胞外區的抗原表位較為隱蔽。

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